توضیحات کلی
هپس HEPES یا (4- (2-هیدروکسی اتیل) پیپرازین-1-اتان-سولفونیک اسید) به‌عنوان یکی از بهترین بافرهای چندمنظوره موجود جهت استفاده در مطالعات و تحقیقات بیولوژی شناخته شده است.
HEPES در اکثر pH های بیولوژیکی زویتریون است و در pH 6 تا 8.5 به‌عنوان بافر بیشترین اثر را دارد. HEPES در مقایسه با بافرهای بی‌کربنات با تغییر در غلظت دی اکسید کربن در حفظ pH فیزیولوژیک در محیط کشت سلول بهتر است.
در روش‌های ایزو الکتریک فوکوسینک (IEF) به‌عنوان یک بافر در اندازه‌گیری کمی و انتخابی واکنش‌های آنتی‌ژن و آنتی‌بادی استفاده شود. ثابت تفکیک (pK) هپس HEPES با کاهش دما، کاهش می‌یابد.
این امر HEPES را به یک عامل بافری مؤثرتر برای حفظ ساختار و عملکرد آنزیم در دماهای پایین تبدیل می‌کند. قدرت بافری هپس HEPES برای مطالعات کشت سلولی معمولاً در محدوده 10 تا 25 میلی مولا است. HEPES دارای تمایل اتصال ناچیزی به یون فلزی است، این امر باعث می‌شود هپس HEPES به‌عنوان یک بافر برای آنزیم‌هایی که ممکن است توسط کلات فلز مهار شوند، انتخاب مناسبی باشد.
با روش سنجش مقدار پروتئین فولین دنیز–سیکالتو تداخل می‌کند و با روش ارزیابی پروتئین Biuret تداخل ندارد. HEPES در محدوده UV جذب کم نشان می‌دهد، اما با آزمایش پروتئین Lowry تداخل ایجاد می‌کند و نتایج مثبت کاذب می‌دهد. هپس HEPES یا (4- (2-هیدروکسی اتیل) پیپرازین-1-اتان-سولفونیک اسید) توسط مس (II) اکسید (CuO) یک ترکیب معدنیِ جامدِ اکسید مس است که به نام تئوریت نیز شناخته می‌شود اکسید می‌شود.
هپس HEPES می‌تواند رادیکال‌هایی را ایجاد کند که برای مطالعات ردوکس مناسب نیست. در اکسیداسیون فنلی توسط پراکسیدازها تداخل ایجاد می‌کند.
کاربرد
هپس HEPES در موارد زیر استفاده شده است:
- به‌عنوان یک جایگزین خوب برای بافر تریس و فسفات در مطالعات یون‌های فلزی
- در بافر اتصال و شستشو در کروماتوگرافی تبادل یونی
- به‌عنوان یک بافر گریدینگ grinding در مطالعات گیاهی
- در بافر رانینگ در الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید SDS-PAGE
- در بافر در الکتروپوراسیون
- در محیط کشت پستانداران
- به‌عنوان یک بافر برای لقاح آزمایشگاهی و کشت جنین
- در روش سنجش غلظت پروتئین‌های با روش‌های Bradford و BCA
- در تحقیقات آمفیدینیوم کارتره، زیرا برای این جلبک‌ها سمی نیست.
- این ماده در بافر استخراج برای جلوگیری از آسیب پروتئین‌های گلبول‌های قرمز استفاده شده است.
