مشخصات محصول:
محیط کشت DNase دارواش مناسب برای تشخیص و افتراق باکتری ها در مواجه با کوکسی گرم مثبت (کاتالاز مثبت) و باسیل گرم منفی استفاده می شود.
اساس آزمایش در محیط کشت DNase :
- این آزمایش با هدف تشخیص باکتری های DNase مثبت در محیط کشت طراحی و تولید گردیده است.
- این محیط در ارزیابی فعالیت دزوکسی ریبونوکلئاز (DNase) باکتری ها و قارچ ها و خصوصا به عنوان کمک در تشخیص استافیلوکوک های بیماری زا به کار می رود.
- DNase Test Agar With Toluiden blue برای کمک به تفکیک و تشخیص گونه سراشیای بدون پیگمان که ممکن است به اشتباه به عنوان گونه انتروباکتر و کلبسیلا تشخیص داده شوند، به کار می رود.
- اگر استافیلوکوک آنزیم DNase داشته باشد این آنزیم، اسید نوکلئیک را هیدرولیز می نماید که با استفاده از معرف و ایجاد هاله شفاف در اطراف محل رشد باکتری می توان به این موضوع پی برد.
ویژگی های آزمایش:
- حساسیت: 99% استافیلوکوک های کواگولاز مثبت، DNase مثبت نیز هستند.
- اختصاصیت: 20% استافیلوکوک های کواگولاز منفی، DNase مثبت هستند.
- محیط مناسب برای برداشتن کلنی، پلیت های LEMB Agar یا Trypticase Soy Agar with 5% Sheep Blood حاوی ارگانیسم مورد نظر می باشد.
- از پلیت بلاد آگار برای استافیلوکوک ها و بلاد آگار یا مک کانکی برای نمونه های گرم منفی استفاده میشود.
تجهیزات و مواد مورد نیاز محیط کشت DNase :
- معرف اسید کلریدریک یک نرمال یا معرف تولوئیدین بلو
- محیط کشت DNase دارواش
پروتکل محیط کشت DNase دارواش:
پلیت های DNase Test Agar یا DNase Agar with Toluidine Blue را با نمونه مورد نظر به صورت نقطه ای (یا خطی) تلقیح نمایید.
پلیت ها را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در دمای ۲ + ۳۵ سانتی گراد انکوبه نمایید.
پس از انکوباسیون، روی پلیت های DNase Test Agar ساده، اسید کلریدریک ۱ نرمال و یا تولوئیدین بلو
۰.۱٪ بریزید به گونه ای که سطح پلیت را کاملا بپوشاند و سپس آن را بر روی زمینه تیره قرار داده و بررسی نمایید.
تلقیح باید نقطه ای باشد، چون بعضی از سویه های استافیلوکوک اورئوس به خوبی بر روی محیط، رشد نمی کنند و در نتیجه میزان رشد برای ارزیابی فعالیت DNase کافی نخواهد بود. در صورت تلقیح نقطه ای، حتی اگر در محل تلقیح، رشدی ایجاد نشود می توان فعالیت DNase را ارزیابی نمود.
