کاربرد کیت:
کاربرد بیولوژی مولکولی PCR
توضیحات:
مخلوطی آماده برای انجام تست‌های PCR است که محتویات آن شامل Taq DNA Polymerase، بافر PCR، MgCl2، dNTPs و آب مقطر است. این کیت شامل تمام محتویات موردنیاز برای PCR به‌غیراز رشته DNA و پرایمر است. مستر میکس سینا کلون مناسب برای 100 تست 2X PCR در حجم 25 میکرولیتر می‌باشد. استفاده از مسترمیکس به‌عنوان یک ترکیب اصلی در طول آزمایش PCR، باعث کاهش مراحل حجم‌برداری می‌شود. کم‌شدن تعداد مراحل حجم‌برداری، احتمال بروز آلودگی را کاهش می‌دهد. در نتیجه اعتبار و صحت آزمایش افزایش خواهد یافت.
محتویات کیت سیناکلون:
Master Mix 25ml
DNase free Water 3ml
روش استفاده:
ابتدا، ویال اصلی که شامل Master Mix با حجم 1.25 ml می‌باشد را با حجم 3 ml آب مقطر ترکیب کرده تا محلول اولیه برای 100 تست بدست بی آید.
برای انجام هر بار تست PCR نیاز به 12.5 میکرولیتر محلول Master Mix و 12.5میکرولیتر DNA و پرایمر است که به حجم کلی 25 میکرولیتر برسد. رنگ موجود در مسترمیکس این امکان را فراهم می‌کند تا محصول PCR به طور مستقیم و بدون نیاز به بافر لودینگ بر روی ژل آگارز استفاده شود.
روش نگهداری:
کیت در دمای -20 درجه سانتیگراد تا تاریخ انقضا پایدار است.
برای جابه‌جایی از یخ خشک یا یخ استفاده شود.
نکات احتیاطی:
Master Mix را به‌اندازه حجم‌های مصرفی برای هر بار استفاده تقسیم‌بندی کرده تا از فریز و د فریز شدن متداوم جلوگیری شود.
ذوب شدن مخلوط روی یخ صورت بگیرد در غیر این صورت باعث کاهش راندمان می‌شود.
از جایی که PCR واکنشی قوی است که میزان کمی از DNA را تقویت می‌کند پس احتمال آلودگی و خطا در آن زیاد می‌شود پس برای جلوگیری از آلودگی با پرایمرها باید مراقبت‌های ویژه صورت گیرد.
آب مقطر باید فاقد هیچ‌گونه قطعه نوکلئوتیدی باشد.
