محلول فايكول(F5415)_سيگما آلدريچ

مشخصات محصول:

• کد محصول:F5415
• واحد: 50و100 میلی لیتر
• کمپانی: سیگما آلدریچ
• CAS Number: 26873-85-8

مشخصات محصول:

محلول فایکول (Lymphosep, Lymphocyte Separation Media) محلول استاندارد آزمایشگاهی بی رنگ و استریل شامل نسبت مناسبی از پودر فایکول و سدیم دیاتروزوات است. از لحاظ شیمیایی ، يك پلي ساكاريد خنثی ، بسیار منشعب ، دارای جرم زیاد، هيدروفيل ( به راحتی در آب حل می شود ) ،با دانسیته های مختلف ( 1.077 و 1.084 ) و شعاع 7-2 نانومتر می باشد .

کاربرد محلول فایکول

1. جداسازی لنفوسیت های B ،T از خون محیطی مغز استخوان و خون بند ناف در مطالعات آزمایشگاه
2. جداسازی سلول های تک هسته ای (PBMC) با استفاده از محلول فایکول ( با دانسيته 1.077 )

روش کار

جداسازی سلول‌های تک‌ هسته‌ای خون محیطی با استفاده از فایکول و گرادیان شیب غلظت انجام می گیرد .
مراحل :
1.ابتدا 10 میلی‌لیتر خون محیطی همراه با ضد انعقاد جمع‌آوری می گردد.
2. خون به نسب برابر با PBS رقیق می شود .
3.محلول حاصل بر روی فایکول (به‌ طوری‌ که به ‌صورت دو لایه جدا از هم قرار گیرند )ریخته شده و با دور 2500 به مدت 20-25 دقیقه سانتریفوژ می گردد.
(چگالي لیمفوسپ بيشتر از چگالي لنفوسيت ها و كمتر از چگالي اريتروسيت ها و گرانولوسيت ها است. پس از سانتريفيوژ كردن اريتروسيت ها و نوتروفيل ها از ميان لیمفوسپ ها عبور كرده و در زير آن ، در كف لوله قرار ميگيرند؛ در حاليكه سلولهاي PBMC در سطح مشترك پلاسماي غني از پلاكت ولیمفوسپ قرار ميگيرند.)

4.سلول‌ های تک ‌هسته‌ای جدا شده با PBS شستشو داده می شود .
5.رسوب سلولی حاصل در محیط غنی شده RPMI همراه با 10% سرم و 1% آنتی‌بیوتیک (پنی‌سیلین استرپتومایسن) به‌صورت سوسپانسیون در می آید .